转录组Hisat2+Stringtie简单定量,处理Stringtie简单定量的结果,以构成矩阵文件
- 前期处理
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第一步:建立基因组fa的索引
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hisat2-build -f 基因.fasta 索引名字
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第二步:比对构建比对排序后的sam文件
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hisat2 --dta -x genome-index -1 clean.R1.fastq.gz -2 clean.R2.fastq.gz | samtools view -b -S -|samtools sort -@ 25 > ./${i}.bam
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第三步:开始计算定量:stringtie
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nohup stringtie -p 10 -G ${in_road}/genom.gff3 -e -o ${out1_road}/${i}.gtf -B -A /${out1_road}/${i}.tab ${in1_road}/${i} > ./log/\${i}-log &
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本脚本即用在处理${i}.gtf 构建FPKM值得矩阵
python3.0 getFPKM.py -i list -g GENE_FPKM -t TRANSCRIPT_FPKM
input list文件应该输入一个制表符分隔的文件,每一行包含样本ID和gtf文件路径,例如:
sampleA A.stringtie.gtf
sampleB B.stringtie.gtf
需要注意的是
输出文件第二行可能是错误的,自己手动删除